NIBSC 18/118 HCT 15癌癥基因組國際標(biāo)準(zhǔn)品的簡介

品牌：英國NIBSC標(biāo)準(zhǔn)品

CRM code（貨號）：18/118

英文名稱：1st International Standard for HCT 15 Cancer Genome

描述：HCT 15癌癥基因組國際標(biāo)準(zhǔn)品

產(chǎn)品用途：

材料18/118為凍干、純化的人HCT 15細(xì)胞基因組DNA（gDNA）。材料具有與PIK3CA c.1633G>A（E545K）相關(guān)的一致性變異百分比，以及每二倍體人類基因組質(zhì)量的一致性變異和PIK3CA總拷貝數(shù)。可通過應(yīng)用計(jì)算（見附錄I）稀釋材料，以產(chǎn)生PIK3CA c.1633G>A（E545K）變異百分比范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品。該材料擬用作校準(zhǔn)二級標(biāo)準(zhǔn)品、試劑盒和分析的一級標(biāo)準(zhǔn)品。材料不作為運(yùn)行控制。該材料經(jīng)外部實(shí)驗(yàn)室檢測，可作為下一代測序（NGS）和數(shù)字PCR（dPCR）的標(biāo)準(zhǔn)。除了PIK3CA c.1633G>A（E545K）臨床相關(guān)變體外，材料還包括可用于NGS分析驗(yàn)證的非臨床相關(guān)變體（見附錄II）。該材料由世界衛(wèi)生組織（WHO）生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會于2019年建立，作為WHOdi一個(gè)個(gè)HCT 15癌癥基因組國際標(biāo)準(zhǔn)，NIBSC材料代碼18/118。

材料的使用：

在復(fù)原之前，不得嘗試稱量凍干材料的任何部分

a、 如上文第6節(jié)所述打開安瓿。

b、 在室溫下用100μl無核酸酶水將凍干材料復(fù)原。

c、 使用移液管將樣品轉(zhuǎn)移到無核酸酶管中，確保收集到zui大可用體積。

d、 使材料在室溫下復(fù)原1小時(shí)，并用移液管充分混合。1x Tris-EDTA緩沖液中的DNA濃度現(xiàn)在約為50ng/μl，但建議在使用前使用自己的定量方法進(jìn)行確認(rèn)。不應(yīng)擔(dān)心材料中可能出現(xiàn)的白色斑點(diǎn)。

e、 該變體材料可與材料18/164（野生型）結(jié)合，以任何選定的變體百分比生成標(biāo)準(zhǔn)；見附錄I。

f、 將所需量添加到您的分析中。可進(jìn)一步稀釋材料（使用無核酸酶水或合適的緩沖液），以達(dá)到適合您的分析的DNA濃度。

g、 一級和二級標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)在同一分析中進(jìn)行分析，以便為二級標(biāo)準(zhǔn)賦值。

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